
在上一期視頻,我們聊到了生物制品支原體快檢,qPCR試劑盒選擇的兩個重要事項:
第一、一定要選檢測結果更精確的探針法試劑盒,第二、一定要選不需要樣品富集前處理,取樣后直接可以上手檢測的試劑盒,這樣能夠簡單快捷,保證實驗精準、可重復性高,避免返工。
今天,我們繼續分享支原體qPCR檢測試劑盒選擇的另外兩個重要細節,讓你選對試劑盒,實驗真正又快又準。
首先要提前弄清,其中的核心試劑是液態還是凍干粉。
有的試劑盒核心試劑是液態,全程需要-20℃冷凍保存,不但運輸、儲存麻煩,而且更容易因為溫度的波動而造成試劑效價衰減、靈敏度下降,進而造成實驗數據偏差。
相比之下,凍干粉劑型是更優選擇,只需2–8℃冷藏,運輸更簡單,關鍵是試劑穩定性更好,對實驗結果的準確性與一致性更有保障。
當然這個劑型的優劣原理大家都懂,但由于技術的差異,也不是每個廠家都能把試劑做成凍干粉,所以核心試劑是凍干粉的試劑盒,事實上擁有更高的技術含量。快檢支原體試劑盒中,核心試劑是凍干粉的優秀范例,就是德國MB生產的名為:VenorGem qEP Kit的一款試劑盒。
另一個注意事項就是,qPCR試劑盒和qPCR儀的適配性。當然這個試劑盒能配適的儀器品牌越多越好,但有的qPCR試劑盒由于擴增程序、熒光通道、反應體系僅針對1-2款特定熒光定量PCR儀優化,如果跨品牌、跨機型,極易出現擴增效率低下、熒光信號弱、結果判讀不準等問題。所以能配適所有主流機型的試劑盒,不僅使用起來方便,也說明了試劑盒中運用的技術含量越高。其中典型的代表就是德國MB公司生產的貨號為11-9100的試劑盒。
總結干貨,我們以全球生物項目一邊倒地青睞的德國MB公司生產的VenorGem qEP Kit(貨號11-9100)為例,總結優秀試劑盒的選擇要點:
1,高特異性探針法,
2,樣品無需前處理,僅需200μL樣本即可完成檢測;
3,核心試劑為高品質凍干粉劑型,
4,全主流熒光定量PCR儀全覆蓋適配。
細節決定成敗,選對試劑盒,讓你實驗真的有準又快。
你們實驗室怎樣檢測支原體,踩過哪些坑,快來評論區說一說吧。
一次一個小妙招,讓生物實驗更順暢!